犬細(xì)小病毒抗原檢測卡說明書
原理:犬細(xì)小病毒抗原快速檢測卡采用了快速免疫層析檢測技術(shù),用于檢測犬細(xì)小病毒抗原。把直腸或糞便取得樣本加入到加樣孔后,與膠體金標(biāo)記的抗CPV單克隆抗體一起沿層析膜移動。若樣品中存在CPV抗原時,與檢測線上的抗體結(jié)合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在CPV抗原時,則不產(chǎn)生顏色反應(yīng)。?
【操作方法】
在檢測卡的加樣孔內(nèi)加入2滴(100ul)待檢血清或血液樣品。
將檢測卡平放于桌面上,在室溫下靜置20分鐘內(nèi)判定結(jié)果。超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。
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【使用步驟】
1.在反應(yīng)板孔中間加2滴洗滌液,待液體充分吸入
?2.取100ul標(biāo)本血清加入反應(yīng)孔中間,待液體充分吸入
?3.小心揭掉紅色濾蓋,在反應(yīng)孔中間加2滴洗滌液,待液體充分吸入
?4.在反應(yīng)孔中間加4滴金標(biāo)液,待液體充分吸入
5.在反應(yīng)孔中間加2滴洗滌液,待液體充分吸入,觀察結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
反應(yīng)板中央出現(xiàn)十字紅線為陽性,只出現(xiàn)一字橫線為陰性;橫線與豎線均不出現(xiàn),或僅豎線出現(xiàn)為試劑失效或操作有誤,應(yīng)當(dāng)重新測試。
組織檢測步驟:
1、將樣本魚蝦蟹、畜禽肉、內(nèi)臟等去皮去脂肪,用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,稱取3±0.05g均質(zhì)物至15ml離心管中。
2、依次加入4ml蒸餾水、0.5ml試劑A和0.6ml衍生化試劑,振蕩混勻,在65℃水浴中孵育30min。
3、依次加入1ml試劑B、0.4ml試劑C和1瓶提取劑(4ml),振蕩混勻。
4、在室溫下(20-25℃)4000r/min離心5min,取2ml上層有機(jī)相至5ml離心管中,在50-60℃水浴中用氮?dú)猓ɑ蚬咎峁┑目諝獯蹈蓛x)吹干。
5、取1ml凈化劑溶解干燥物,再加入0.5ml試劑D振蕩混勻,在室溫下(20-25℃)4000r/min離心2min,待檢。
?如使用全血標(biāo)本檢測,標(biāo)本的移動速度可能較慢,必要時可在加樣約1分鐘后,在加樣孔內(nèi)滴加1滴PBS作輔助液,以促進(jìn)標(biāo)本移動。
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